Гібридний метод перевірки точності дозаторів

Гравіметричний і фотометричний методи перевірки точності гарно працюють для одноканальних дозаторів.
А що робити, якщо треба перевірити багатоканальний?

Перевіряти кожен канал окремо? Можна і так.

Проте гібридний метод калібрування буде зручніший. Він поєднує в собі гравіметрію і фотометрію, і розроблений спеціально для багатоканальних дозаторів.

Переваги гібридного методу:

Відповідність реальним умовам методики.
Гібридний метод імітує реальний процес роботи з планшетом і виявляє просторові тренди (напр., крайові ефекти), дозволяє побудувати карту рівномірності об’ємів.

Робота з малими об’ємами.
При гравіметрії на малих об’ємах зростає вплив випаровування і похибка тарування. Для точної гравіметрії потрібні стабільні умови довкілля й висококласні ваги. За браку таких умов гібридний метод дозволяє мінімізувати час роботи на вагах і перенести масові вимірювання в рідер.

Необхідне обладнання:

ІФА зчитувач: референс 620 нм + робоча довжина хвилі 405/450/492 нм (залежно від хромофора).

Ваги з роздільною здатністю 0,1 мг.

Хромофори: 4-нітрофенол, Orange G або тартразин (чистота ≥ 95 %).

Прозорі мікропланшети з кришками.

Калібровані дозатори та сумісні наконечники.

Як це працює?

Гравіметричний етап

Гравіметрично визначається фактична середня вага і об’єм дозованої рідини з усіх каналів.

Тестовий об’єм дозується в лунки, планшет негайно накривається й зважується; інтервал між дозуванням і зважуванням має бути мінімальним. Середня подана маса на лунку визначається як різниця показів «після–до», поділена на кількість одночасно заповнених лунок

Маса_середня = (маса_загальна – маса_порожня)/кількість лунок

Далі маса переводиться в об’єм за густиною при робочій температурі або через лабораторний Z-фактор (якщо застосовується).

Фотометричний етап

Перший крок – конверсійний.
Він потрібен, щоб співвіднести оптичну густину, виміряну фотометром, з об’ємом дозованої тестової рідини у мікролітрах. У лунки планшету дозується розчин барвника. Вимірювання проводяться на тестовій хвилі для обраного хромофора, та на референсній, референс віднімається від робочого сигналу. Після чого визначається середня оптична густина (Ā)

На підставі об’єму, отриманого за результатами зважування, та середнього значення ОГ обчислюється коефіцієнт конверсії C (C = Об’єм_середній/ОГ_середня)

Другий крок – тестовий.
Розчин хромофора дозується кожним каналом у «свою» лунку. Зчитування виконуються у тих самих налаштуваннях, що й для конверсійного планшета: робоча довжина хвилі з відніманням референсу ~620 нм.

Фактичний об’єм у кожній лунці (Vj) визначається перерахунком ОГ (Aj) через коефіцієнт конверсії, отриманий на попередньому кроці за формулою Vj=C⋅Aj

Застосування кількох уточнювальних коефіцієнтів завершує перевірку точності дозатора.

Гібридний метод перевірки точності дозатора досяжний у лабораторії з ІФА-зчитувачем та аналітичними вагами. Детальні процедури подано в ISO 8655-7. Якщо у вас виникли запитання — звертайтесь.

Бажаємо мінімальних похибок і низьких CV!